Bộ nhuộm gram Gram Stain-kit
- Bộ nhuộm gram dùng để phân biệt các loại khuẩn dựa trên gram + hoặc gram (-) Nhuộm gram là kỹ thuật được sử dụng phổ biến trong phòng thí nghiệm vi sinh.
- Nó là tiêu chí quan trọng cho bất kỳ sơ đồ nhận dạng nào của tất cả các vi khuẩn phân lập. Cơ chế khác nhau đã được đề xuất để giải thích các phản ứng gram. Có nhiều sự khác biệt về sinh lý giữa thành tế bào gram dương và gram âm.
- Kể từ khi Christian Gram phát hiện ra nhuộm Gram, quá trình này đã được nghiên cứu và xác định lại rộng rãi. Trong thực tế, một vệt mỏng của các tế bào vi khuẩn được nhuộm màu tím(crystal violet), sau đó được xử lý bằng chất gắn iốt để tăng sự gắn kết của vết nhuộm.
- Một dung dịch khử màu của rượu hoặc acetone được sử dụng để loại bỏ crystal violet khỏi các tế bào liên kết với nó một cách yếu ớt và sau đó phẩm màu phụ (như safranin) được sử dụng để cung cấp độ tương phản màu trong các tế bào bị phân hủy.
- Vi khuẩn gram dương có thành tế bào giống như lưới dày làm từ peptidoglycan (50-90% cell envelope), và kết quả là nhuộm màu tím bởi màu tím(crystal violet), trong khi vi khuẩn gram âm có lớp mỏng hơn (10% vỏ tế bào), vì vậy không giữ lại vết màu tím và được nhuộm màu hồng bởi safranin.
- Trong một vết nhuộm đúng cách bằng quy trình nhuộm gram, vi khuẩn gram positive xuất hiện màu xanh lam đến màu tím và các tế bào gram âm xuất hiện màu hồng tới màu đỏ.
Thành phần
- Gram’s Crystal Violet (S012)(Solution A) –
Crystal Violet 2.000 gm
Ethyl alcohol,95% 20.000 ml - Gram’s Crystal Violet (S012)(Solution B) –
Ammonium oxalate 0.800 gm
Distilled Water 80.000 ml
Dung dịch A và B được trộn và trữ trong vòng 24 giờ trước khi dùng. Kết quả nhuộm sẽ rất tốt. - Gram’s Decolourizer(S032) –
Acetone 50.0 ml - Gram’s Iodine(S013) –
Iodine 1.000 gm
Potassium iodide 2.000 gm
Distilled water 300.000 ml - Safranin,0.5% w/v(S027)
Safranin O
Ethyl alcohol, 95%
